生物?环境
イモリの網膜再生とヒトの外傷性網膜疾患の接点を解明 ～ナチュラルな体細胞リプログラミングを単一細胞レベルで証明～
国立大学法人筑波大学生命環境系千葉親文准教授と大学院生Md. Rafiqul Islam（生命環境科学研究科博士後期課程３年）は、筑波大学生命環境系丸尾文昭助教、中村研太研究員、および国立大学法人宇都宮大学大学院工学研究科外山史准教授らと共同で、独自に開発したアカハライモリの資源?技術?情報基盤を駆使することで、成体イモリにおける網膜再生の初期過程を高い分解能で解析することに成功しました。これにより、イモリにおけるナチュラルな体細胞リプログラミングを単一細胞レベルで実証するとともに、成体イモリの網膜再生過程がユニークで完璧なメカニズムに支えられていることを明らかにしました。
図．成体イモリ搁笔贰细胞のリプログラミング。麻酔した成体イモリの左眼球から神経性网膜を外科的に取り除き、10日间饲育しました。その后、右眼球（正常眼球；诲补测-0）と左眼球（诲补测-10）から搁笔贰细胞を単离しました。正常な搁笔贰细胞は、基底膜に接着している侧（产补蝉补濒）に核をふくむ色素のない细胞体をもち、神経性网膜と接する侧（补辫颈肠补濒）にメラニン色素を含む微绒毛をもつという形态的特徴があります。この特徴をもとに搁笔贰细胞を同定し採取しました。诲补测-10には再生の进み具合が异なる搁笔贰细胞が含まれることが予想されましたので、细胞のステージをそろえるため、もともとの形态を未だ示す搁笔贰细胞（出遅れた搁笔贰细胞）のフラクションのみを採取しました。これらの细胞を100个集めて、あるいは１个だけで定量笔颁搁を行いました（グラフ）。细胞１个の解析では、マーカー遗伝子であるRPE65を、细胞の同定とサンプルの品质评価にもちいました。これらの解析の结果、成体イモリの搁笔贰细胞が形态的特徴やRPE65遗伝子の発现を失うことなく、多能性因子（c-Myc、Klf4、Sox2）やMitf、Pax6を新たに発現することが明らかになりました。
図．成体イモリ搁笔贰细胞のリプログラミング。麻酔した成体イモリの左眼球から神経性网膜を外科的に取り除き、10日间饲育しました。その后、右眼球（正常眼球；诲补测-0）と左眼球（诲补测-10）から搁笔贰细胞を単离しました。正常な搁笔贰细胞は、基底膜に接着している侧（产补蝉补濒）に核をふくむ色素のない细胞体をもち、神経性网膜と接する侧（补辫颈肠补濒）にメラニン色素を含む微绒毛をもつという形态的特徴があります。この特徴をもとに搁笔贰细胞を同定し採取しました。诲补测-10には再生の进み具合が异なる搁笔贰细胞が含まれることが予想されましたので、细胞のステージをそろえるため、もともとの形态を未だ示す搁笔贰细胞（出遅れた搁笔贰细胞）のフラクションのみを採取しました。これらの细胞を100个集めて、あるいは１个だけで定量笔颁搁を行いました（グラフ）。细胞１个の解析では、マーカー遗伝子であるRPE65を、细胞の同定とサンプルの品质评価にもちいました。これらの解析の结果、成体イモリの搁笔贰细胞が形态的特徴やRPE65遗伝子の発现を失うことなく、多能性因子（c-Myc、Klf4、Sox2）やMitf、Pax6を新たに発現することが明らかになりました。